أولا : تشكل الأحماض الأمينية الممثلة في الوثيقة1 وحدات أساسية في تركيب البروتينات إرتباطها يشكل مركبا جديدا.
- ما اسم المركب المتشكل عن إرتباط هذه الأحماض.
- أحسب الإحتمالات التي قد يكتب بها المركب الناتج مستعملا استدلالا رياضيا دقيقا.
ملاحظة : حسب ترتيب الأحماض الأمينية التي تدخل في تركيب المركب وعدم تكرار نفس الحمض.
ثانيا : لنتمكن من معرفة تتابع هذه الأحماض في إحدى صيغ هذا المركب نستعمل تقنية خاصة تعرف بتقنية تفكك إدمان « Dégradation de Edman » التي تعتمد على إستعمال مادة PTH (الوثيقة 2).
- إشرح مبدأ التقنية المستعملة معتمدا على الوثيقة 2.
- بين بالرسم تأثير مادة PTH على رباعي الببتيد الناتج.
- وضح كيف يتم التعرف على تتابع الأحماض المتبقية في هذه السلسلة.
ثالثا : عندما تكون السلسلة الببتيدية طويلة تصبح هذه التقنية غير فعالة، فتقسم عند إذن السلسلة إلى أجزاء قصيرة تحت تأثير أنزيمات خاصة دور البعض منها على المركب الخماسي ممثل في الوثيقة ر3 ونتائج تأثير هذه الأنزيمات على المركب ممثلة في الوثيقة 4.
- مثل الصيغة الكيميائية المفصلة للمركب الخماسي مجهول التسلسل مستغلا النتائج السابقة والوثيقتين 1 و 4.
- حدد على المركب الناتج مقر تأثير الأنزيمات السابقة الذكر.
رابعا : سمحت لنا طريقة الفصل الكروماتوغرافي والهجرة الكهربائية بالتعرف على المركب الموضح في الوثيقة 5.
- حدد تتابع الأحماض الأمينية للببتيدات الناتجة عن معاملة هذا المركب بأنزيم CNBr.
- ما عدد المجاميع الحمضية والأمينية التي يحملها كل ببتيد ناتج ؟
- إستخلص شحنة الببتيدات الناتجة بعد وضعها في وسط حامضي قوي، ثم حدد شحنتها في وسط قاعدي قوي.
أولا :
1. المركب المتشكل يدعى : خماسي الببتيد
2. حساب عدد الإحتمالات:
الحصيلة: 5X4X3X2X1=120
هناك 120 كتابة محتملة
ثانيا:
1. مبدأ تقنية Edman
ترتبط مادة PTH مع الحمض الأميني الأول في السلسلة من طرفها الأميني وهذا ما يسمح بفصل هذا الحمض عن باقي السلسلة الببتيدية
2. تأثير مادة PTH على رباعي الببتيد الناتج
3. التعرف على تتابع الأحماض الأمينية المتبقية في السلسلة:
كلما عاملنا السلسلة الببتيدية بمادة PNT فإنه يتم فصل الحمض الأميني الأول من هذه السلسلة من طرفها الأميني وبالتالي يتم التعرف عليه
ثالثا :
1. الصيغة الكيميائية المفصلة:
رابعا :
1. تتابع الأحماض الأمينية للببتيدات الناتجة :
2. عدد المجاميع الحمضية والأمينية التي يحملها كل ببتيد ناتج :
الببتيد 1: 2 حمضية + 2 قاعدية
الببتيد 2: 2 حمضية + 1 قاعدية
3. شحنة الببتيدات الناتجة بعد وضعها في وسط حامضي قوي ثم في وسط قاعدي :